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classic 124a溯遠(yuǎn)sanger測(cè)序儀
classic 124a溯遠(yuǎn)sanger測(cè)序儀
聚慕貨號(hào) : JM1966-794477
商品類別 : 實(shí)驗(yàn)室儀器 / 臨床檢驗(yàn)
批準(zhǔn)文號(hào) : 皖械注準(zhǔn)20242220068
類 別 : 二類醫(yī)療器械
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Sanger測(cè)序,也稱為雙脫氧鏈終止法(Dideoxy Chain?。裕澹颍恚椋睿幔簦椋铮睢。停澹簦瑁铮洌?,是由Frederick?。樱幔睿纾澹蚣捌渫略冢保梗罚纺觊_(kāi)發(fā)的***種用于確定DNA序列的方法。盡管這種方法已經(jīng)被高通量測(cè)序技術(shù)部分取代,但它仍然被廣泛應(yīng)用于小規(guī)模的基因測(cè)序、驗(yàn)證下***代測(cè)序(NGS)結(jié)果以及克隆質(zhì)粒等場(chǎng)景中。

傳統(tǒng)的Sanger測(cè)序過(guò)程涉及以下幾個(gè)步驟:

PCR擴(kuò)增:***先,目標(biāo)DNA片段需要與引物***起進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

鏈終止反應(yīng):接下來(lái),在四個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)體系中分別加入***定比例的四種常規(guī)脫氧核苷酸(dNTPs)和***種標(biāo)記了熒光染料或放射性同位素的雙脫氧核苷酸(ddNTPs),每種反應(yīng)體系包含不同的ddNTP。當(dāng)***個(gè)ddNTP被聚合酶添加到正在生長(zhǎng)的DNA鏈上時(shí),該鏈的增長(zhǎng)就會(huì)停止,因?yàn)槿鄙伲常В希然鶊F(tuán)。

電泳分離:隨后,所有反應(yīng)產(chǎn)物混合后通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)或毛細(xì)管電泳根據(jù)大小分離這些不同長(zhǎng)度的DNA片段。

讀取序列:***后,通過(guò)檢測(cè)每個(gè)片段末端標(biāo)記的信號(hào)來(lái)確定其對(duì)應(yīng)的堿基類型,并由此推斷原始DNA模板的序列。

現(xiàn)代的Sanger測(cè)序儀,如Applied Biosystems公司的3500系列遺傳分析儀,已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化操作流程,包括自動(dòng)進(jìn)樣、電泳、數(shù)據(jù)收集和初步分析。


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